Комплексное исследование на вирусы ЦМВ, ВЭБ, ВГЧ 6 (Cytomegalovirus, Epstein Barr Virus, Human Herpes Virus 6), ДНК [реал-тайм ПЦР], количественно
Комплексное исследование, направленное на обнаружение генетического материала (ДНК) цитомегаловируса, вирус Эпштейна - Барр, вируса герпеса человека 6-го типа методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.
Для видов биоматериала с низким содержанием клеток (слюна, мазок из зева (ротоглотки), ликвор) расчет концентрации вирусной ДНК производится на единицу объема биоматериала (единицы измерения: копий ДНК/мл).
Линейный диапазон измерения тест-системы: 1.0*10^3-1.0*10^7 копий/мл.
Для видов биоматериала с высоким содержанием клеток (венозная кровь, биоптат) количество вирусной ДНК нормируется на количество клеток человека в образце (единицы измерения: lg копий ДНК/10^5 клеток человека).
Синонимы русские
Цитомегаловирус; ЦМВ; вирус Эпштейна - Барр; ЭБВ; герпес-вирус 6-го типа; ВГЧ-6; ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени]; количественный анализ.
Синонимы английские
Cytomegalovirus; CMV; Epstein Barr-Virus; EBV; Human Herpes Virus 6; HHV-6; DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR]; quantitative; qRT-PCR.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Амниотическая жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, биоптат, венозная кровь, ликвор, мазок из зева (ротоглотки), мокрота, слюна.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Рекомендуется употребить большой объем жидкости (чистой негазированной воды) за 8-12 часов до сбора мокроты.
- За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
- Не принимать пищу в течение 1-2 часа до исследования.
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
- За 3-4 часа до сбора слюны не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку. Сбор слюны оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна. Перед сбором биоматериала убедиться, что отсутствуют кровоточивость десен и травмы слизистой оболочки ротовой полости.
- Сбор биоматериала рекомендуется проводить утром. Для исследования необходимо собирать свободно отделяемую мокроту, полученную в процессе глубокого откашливания. В контейнер не должны попадать слюна и отделяемое носоглотки! Это может привести к искажению результатов.
Общая информация об исследовании
Цитомегаловирус, вирус Эпштейна - Барр, вирус герпеса человека 6-го типа являются представителями семейства герпес-вирусов. Они обладают высокой патогенностью для человека, имеют способность к длительному латентному существованию, к персистенции в организме человека и могут вызывать заболевания с различными клиническими проявлениями.
Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) относится к семейству герпес-вирусов человека, рода Cytomegalovirus и является возбудителем цитомегаловирусной инфекции. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) - это широко распространенная инфекция человека, характеризующаяся легким, бессимптомным течением у людей в обычных условиях и с нормально функционирующей иммунной системой. Особое клиническое значение она приобретает у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями и у беременных женщин из-за риска внутриутробного инфицирования плода.
Цитомегаловирус является ДНК-содержащим вирусом, обладающим способностью к медленному распространению в культуре инфицированных клеток и приводящим к их изменению и увеличению размера (цитомегалии). Источником инфекции является человек, выделяющий вирус через различные биологические жидкости. К ним относятся кровь, слюна, моча, грудное молоко, цервикальный и вагинальный секрет, семенная жидкость, ликвор, содержимое желудочно-кишечного тракта и прочие секреты. Инфекция передается воздушно-капельным, контактным, половым путем, в результате переливания крови от инфицированного донора. Возможно также заражение при трансплантации органов и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов. Длительность инкубационного периода заболевания часто установить невозможно, так как большинство клинических случаев не распознается и протекает в латентной, бессимптомной, форме.
Различают приобретенную и врождённую формы ЦМВИ. Приобретенная форма инфекции протекает в виде острого локализованного процесса, схожего по клинической симптоматике с острой респираторной вирусной инфекцией или инфекционным мононуклеозом. Отмечается повышение температуры тела, слабость, общее недомогание, боль в горле, миалгия, увеличение шейных лимфатических узлов. В редких случаях отмечаются осложнения в виде артралгий, артритов, пневмонии, цитомегаловирусного гепатита. У детей до трех месяцев жизни, а также у лиц с патологией иммунной системы (иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях) ЦМВИ может протекать в тяжелой форме с развитием серьезных осложнений. При этом развиваются тяжелые поражения легких, почек, печени, желудочно-кишечного тракта, нервной системы с развитием вирусного энцефалита. Врождённая форма ЦМВИ возникает в результате трансплацентарной передачи инфекции от матери плоду при инфицировании женщины на ранних сроках беременности, особенно при первичном инфицировании. Развивается острая врождённая ЦМВИ, приводящая к самопроизвольному аборту или гибели ребенка на стадии "эмбриона". При поражении плода на более поздних сроках беременности развивается геморрагический синдром с кровоизлияниями в кожу, внутренние органы, отмечается поражение нервной системы.
Вирус Эпштейна - Барр (EBV) относится к семейству герпес-вирусов (Herpesviridae) человека 4-й группы. Он представляет собой ДНК-содержащий лимфопролиферативный вирус. Его основной особенностью является способность реплицироваться преимущественно в В-лимфоцитах без последующего разрушения клеток. Помимо этого, вирус может инфицировать Т-лимфоциты и эпителиальные клетки.
Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса - преимущественно воздушно-капельный. У 90-95 % населения некоторых стран выявляются антитела к антигенам вируса, что свидетельствует о предшествующем инфицировании вирусом. Острая инфекция обычно протекает бессимптомно у детей с нормально функционирующей иммунной системой, клинически проявляясь в виде инфекционного мононуклеоза у 30-50 % иммунокомпетентных подростков и взрослых. При патологиях иммунной системы, иммунодефицитных состояниях, при применении иммуносупрессивных препаратов возможно развитие разнообразных патологических процессов и заболеваний, вызванных вирусом Эпштейна - Барр. У таких больных присутствие вируса ассоциировано с развитием различных лимфопролиферативных нарушений и некоторых онкологических процессов, включающих лимфому Беркитта, назофарингеальную карциному, лимфогранулематоз (болезнь Ходжкина), В-клеточную лимфому. Также вирус обнаруживается у пациентов при некоторых аутоиммунных заболеваниях, синдроме хронической усталости.
Инфекционный мононуклеоз - это острое вирусное заболевание, причиной которого является вирус Эпштейна - Барр. В основном заболевание регистрируется у детей и лиц молодого возраста до 35 лет. Инкубационный период заболевания составляет в среднем 5-14 дней, иногда до 30 дней. К клиническим проявлениям заболевания относятся лихорадка, головная боль, поражение зева, нёбных, глоточных миндалин, лимфатических узлов (лимфоаденопатия), увеличение печени и селезенки. Заболевание может протекать в легкой, средней тяжести и тяжелой форме. К осложнениям инфекционного мононуклеоза относятся отиты, синуситы, паратонзиллиты, пневмонии, гепатиты. Редко могут встречаться разрывы селезенки, острая печеночная недостаточность, острая гемолитическая анемия, тромбоцитопения, миокардит, неврит, менингит, менингоэнцефалит. В редких случаях развивается хроническая активная инфекция, при которой симптомы заболевания сохраняются на протяжении более чем 6 месяцев после первичного инфицирования вирусом Эпштейна - Барр.
Вирус герпеса человека типа 6 (ВГЧ-6) представляет собой ДНК-содержащий вирус, относящийся к семейству герпес-вирусов человека. Он способен к репликации в Т-лимфоцитах, но может быть обнаружен в В-лимфоцитах, моноцитах, эндотелиальных клетках, гепатоцитах и ряде других. Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса преимущественно воздушно-капельный. Возможна передача вируса вертикальным путем от матери к плоду во время беременности, при гемотрансфузиях, во время операций и при трансплантации органов.
Вирус способен проникать в лимфатическую систему и вызывать заболевания с разнообразной клинической симптоматикой. Чаще всего патологический процесс, вызванный ВГЧ-6, развивается у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, в частности при ВИЧ-инфекции, при применении иммуносупрессивной терапии, после трансплантации органов, при аутоиммунных заболеваниях.
В большинстве случаев инфекция, вызванная ВГЧ-6, протекает бессимптомно. К основным клиническим проявлениям относятся лихорадка, экзантема в виде эритематозных пятен или пятнисто-папулезной сыпи. В некоторых случаях возможно развитие осложнений со стороны центральной нервной системы: судороги, энцефалит, менингоэнцефалит, серозный менингит. У иммунокопрометированных лиц инфекция характеризуется тяжелым течением, генерализацией процесса. Развиваются лимфаденопатии, пневмония, гепатит, энцефалит.
Диагностика вирусной инфекции, вызванной представленными вирусами, является комплексной и основана на оценке клинических проявлений заболеваний и лабораторных методов диагностики. Современные методы лабораторной диагностики играют важную роль в диагностики герпес-вирусных инфекций, особенно на ранних стадиях инфекционного процесса. К таким методам относится метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) - это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) бактерий даже при их малом содержании в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Для диагностики может использоваться разнообразный биологический материал, взятый у детей, взрослых лиц, людей с патологией иммунной системы, беременных женщин. Метод позволяет определять количество молекул ДНК исследуемого вируса, что является важным в диагностике острой формы инфекции, реактивации персистентной инфекции, носительстве вируса, а также при контроле эффективности проводимой противовирусной терапии.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики и подтверждения инфекционного процесса, вызванного цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна - Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа.
- Для диагностики острой или текущей вирусной инфекции.
- Для диагностики первичной инфекции и/или активной формы инфекции в период реактивации (обострения) персистентной инфекции.
- Для дифференциальной диагностики инфекций, вызванных герпес-вирусами.
- Для дифференциальной диагностики инфекций, протекающих с развитием ангин, тонзиллитов, высыпаниями, лихорадкой.
Когда назначается исследование?
- При диагностике и дифференциальной диагностике инфекций, вызванных герпес-вирусами.
- При клинических проявлениях заболеваний, вызванных цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна - Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа, или при их бессимптомном, латентном течении.
- При обследовании женщин, планирующих беременность, и женщин при патологиях имеющейся беременности.
- При комплексном обследовании пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями и гемобластозами.
- При обследовании реципиентов органов и тканей до и после трансплантации, при проведении иммуносупрессивной терапии.
- При диагностике вирус-ассоциированных заболеваний у ВИЧ-инфицированных и при других иммунодефицитных состояниях.
- При контроле за эффективностью проведенного лечения противовирусными препаратами.
Что означают результаты?
Референсные значения: не обнаружено.
Причины положительного результата:
- Инфицирование цитомегаловирусом или носительство вируса.
- Инфицирование вирусом Эпштейна - Барр или носительство вируса.
- Инфицирование вирусом герпеса человека 6-го типа или носительство вируса.
Причины отрицательного результата:
- Отсутствие инфицирования цитомегаловирусом;
- Отсутствие инфицирования вирусом Эпштейна - Барр;
- Отсутствие инфицирования вирусом герпеса человека 6-го типа.
Также рекомендуется
- Cytomegalovirus, ДНК, количественно [реал-тайм ПЦР]
- Epstein Barr Virus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Human Herpes Virus 6, ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Cytomegalovirus предранний белок IEA, IgM, IgG
- Cytomegalovirus, IgG
- Cytomegalovirus, IgM
- Cytomegalovirus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Антитела к Cytomegalovirus (IgG) с определением авидности
- Human Herpes Virus 6, IgG
- Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgM
- Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG
- Epstein Barr Virus ядерныйантиген (EBNA), IgG (количественно)
- Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgG
- Лабораторная диагностика инфекционного мононуклеоза
- Определение авидности иммуноглобулинов класса IgG к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна - Барр
Кто назначает исследование?
Терапевт, врач общей практики, инфекционист, аллерголог-иммунолог, акушер-гинеколог, неонатолог, педиатр, уролог, оториноларинголог, гематолог, невропатолог, хирург, онколог.
Литература
- Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
- Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. - 2013.
- Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. - 2005. - 696 с.
- Wang L, Xu X, Zhang H, Qian J, Zhu J. Dried blood spots PCR assays to screen congenital cytomegalovirus infection: a meta-analysis / Virol J. 2015 Apr 14;12:60.
- VanGuilder HD, Vrana KE, Freeman WM (2008). "Twenty-five years of quantitative PCR for gene expression analysis". Biotechniques 44: 619 - 626.
Описание по материалам Helixbook (09-168).